Fororesans mikroskobu ile optik mikroskop arasındaki farklar
Başvuru:
Floresan mikroskop ve optik mikroskop farklıdır, numunelerdeki sıradan aydınlatma değildir, ancak numune içinde belirli ışık dalga boylarının (tipik olarak ultraviyole ışık, mavi ışık eksitasyon floresan mikroskobu) kullanılması, emisyon floresan, bu nedenle ışık, floresan mikroskobu doğrudan aydınlatmanın rolü değil, enerjinin floresan malzeme heyecanlı örnekleridir. Numuneyi, aydınlatma nedeniyle değil, floresan ışık floresan malzemeden kaynaklanan, emilimi gösteren heyecanlı fenomenden dolayı değil, numunenin içinde gözlemleyebiliriz. Bu nedenle, floresan mikroskopisinin özellikleri, özellikle ışık kaynağı, heyecan ışığının çok sayıda spesifik dalga boyu aralığını sağlayabilir, böylece numune içindeki floresan malzeme incelemesi ile gerekli lüminesans yoğunluğunu elde etmek için. Aynı zamanda floresan mikroskopinin ilgili filtre sistemine sahip olması gerekmektedir. Floresan mikroskopi immünofluoresans histokimyası için temel bir araçtır. Optik sistemin ve kamera sisteminin ana bileşenleri olan ultra yüksek basınçlı ışık kaynağı, filtre sistemi (filtre plakasının çıkarılması ve bastırılması dahil), floresan yayan örnekleri heyecanlandırmak için belirli bir dalga boyu kullanmaktır.
1 Floresan eksitasyon yolu: işığın dalga boylarına göre UV eksitasyon yöntemi (ultraviyole aydınlatma yöntemi kullanılarak) ve BV ekscitasyon yöntemi (mavi menekşe kullanılarak) ikiye ayrılır. UV excitation yöntemi, 400nm'den daha kısa olan ultraviyole ışığa yakındır. Yöntem mevcut değil görünür lüminesans, floresan ve floresan boyayı doğal hale getirdiği gözlendi, spesifik floresan ve arka plan dokusu otofluoresansı üzerinde ayırt etmek kolay örnekler.
2. BV excitation yöntemi: 404nm, 434nm UV'den mavi ışık ekscitasyon merkezi olarak. Yöntem mavi ışık ışınlama örneği kullanır, bu nedenle floresan gözlem sistemi kesme filtresi, mavi ve yeşili, Huang Yingguang'ı gerekli filtreden tamamen engellemek için kullanılmalıdır. Floresan pigment floresan antikor yöntemi için. Maksimum emisyon dalga boyu, ekscitasyon ışığının ve floresanının maksimum emilim dalga boylarına yakındır, bu nedenle kullanılan BV ekscitasyon filtresi yöntemi keskin bir kesme filtresi kullanmalıdır. Yöntem, heyecan verici açık mavi ışık olarak kullanılabilir, bu nedenle floresan pigment emilim verimliliği yüksektir, görüntüyü daha parlak alabilir. Dezavantajı, 500nm'nin altındaki ve 500nm'nin üzerindeki floresan göremedi, böylece görüntü sarı renkte. Floresan antikor yöntemi, çoğunlukla floresan pigmente özgü renge özgü özgüllüğünü belirlemek için, bu nedenle spesifik ince tartışma, BV ekscitasyon yöntemi genellikle büyük etkiye sahiptir.